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| 關于血清的一些問題 | ||||
| 日期:2012/5/29 訪問: | ||||
血清是細胞培養中最重要的元素之一。因此，我們特別整理了一些實驗室里常會遇到的問題，供大家參考：
1． 存放血清最好的方法？ 我們建議血清應保存在－20℃以下。然而，若存放于4℃時，請勿超過半個月。若您一次無法用完一瓶，建議您無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內，再放回冷凍。 2． 如何解凍血清才不會使產品質量受損？ 我們建議您將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，溶解過程中必須規則地搖晃均勻。 3． 血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現，該如何處理？ 血清中沉淀物的出現有許多種原因，但最普遍地原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖素蛋白（形成凝血地蛋白之一）在血清解凍后，也會存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質量。 若您欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內，稍微離心，上清液即可接著加入培養基內一起過濾。我們不建議你以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因為它可能會阻塞您的過濾膜。 4．為什么要熱滅活血清？ 加熱可以滅活補體系統。激活的補體參與溶解細胞事件，刺激平滑肌收縮，細胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究，培養ES細胞，昆蟲細胞和平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清。 5．有必要做熱滅活嗎？ 實驗顯示，經過正確處理的熱滅活血清，對大多數的細胞而言是不需要的 。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進，或完全沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的活性，而造成細胞生長速度的降低。而經過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點”，常常會讓研究者誤以為是微生物的分裂擴增。 因此我們建議您，若非必須，您可以不需要做熱處理這一步。如此以來，不但節省你寶貴的時間，更確保血清的質量。 6．如何避免沉淀物的生產？ 我們建議您在使用血清的時候，注意下列的操作： ⑴.解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法（－20℃至4℃至室溫），若血清解凍時改變的溫度太大（如－20℃至37℃），實驗顯示非常容易產生沉淀物。 ⑵.解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻使溫度及成分均一，減少沉淀的發生 ⑶.請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質量。 ⑷.血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。 ⑸.若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高、時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多 | ||||
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